Massonin kolmivärinen värjäyssarja

Massonin kolmivärinen värjäysmenetelmä, joka tunnetaan myös nimellä Masson värjäys, on klassisempi kollageenikuituvärjäysmenetelmä. Tämä menetelmä hyödyntää anionisten biologisten väriaineiden ja molekyylipainojen erilaista läpäisevyyttä sidekudoksissa. Pienen molekyylipainon omaavat värit tunkeutuvat helposti tiiviiksi rakenteeltaan ja heikosti läpäiseviin kudoksiin, kun taas suuren molekyylipainon omaavat värit pääsevät vain rakenteeltaan löysästi ja hyvin läpäiseviin kudoksiin, joten eri kudoskomponenteilla on eri värit.

Tämä tuote on sarja, jonka pääkomponentit ovat seuraavat: Liuos on 2,5 % kaliumdikromaattia, B-liuosta ja C-liuosta sekoitetaan yhtä suurena tilavuutena Weigertin rautahematoksyliiniväriliuokseksi, D-liuos on Ponceau-happofuksiini, E-neste on 1 % fosfomolybdeenihappoliuos, ja F neste on 2,5 % aniliinisiniliuosta. Kun sidekudosleikkeet värjätään Massonin trikromivärjäysliuoksella, kollageenisäikeet näkyvät taivaansinisestä kirkkaan tummansiniseen, lihaskuidut, sytoplasma, selluloosa ja keratiinivalkoinen punaisesta purppuranpunaiseen ja punasoluissa vaaleanpunaisia.

Säilytys huoneenlämmössä, voimassa 12 kuukautta.

1. Leikkeen valmistus: parafiinileikkeistä poistetaan parafiini vedeksi; -20 asteessa säilytettyjen pakasteleikkeiden on annettava seistä ja palata huoneenlämpöön.

2. Liota viipaleita Masson A -liuoksessa huoneenlämmössä yön yli (noin 15 tuntia).

3. Liota viipaleet Masson A -liuoksessa ja inkuboi 65-asteisessa uunissa 30 minuuttia. Pese vesijohtovedellä 30 s, kunnes kudoksen keltainen väri haalistuu. Laita samalla Masson D -neste ja Masson F -neste 65-asteiseen uuniin esikuumenemaan.

4. Sekoita Masson B -liuosta ja Masson C -liuosta yhtä suureen tilavuuteen (valmistettu nykyiseen käyttöön, ei esivalmistettu ja säilötty), viipaloi sekoitettuun liuokseen ja liota 1 minuutin ajan, huuhtele sitten juoksevalla vedellä.

5. Laita viipaleet 1-prosenttiseen kloorivetyhappoalkoholiin (väkevä suolahappo: absoluuttinen etanoli=1:100) erilaistumaan noin 1 minuutiksi, kunnes ydin on harmaa-musta ja tausta lähes väritön tai vaaleanharmaa. .

6. Huuhtele vesijohtovedellä ja valuta ylimääräinen vesi siivuista. Upota viipaleet Masson D -liuokseen 6 minuutiksi. Tällä hetkellä kudokset näyttävät kirkkaan punaisilta. Jos punainen on liian vaalea, värjäysaikaa voidaan pidentää.

7. Valuta viipaleet hieman (ei kuivia viipaleita) ja liota Masson E -liuoksessa noin 1 min. Tämä vaihe on eriyttämistä varten. Riittää, kun erottuu, kunnes kollageenisäikeet ovat vaaleanpunaisia ​​ja kuidut punaisia. E-liuoksen aikaa voidaan säätää värjäytymisasteen mukaan, yleensä 1-2 min.

8. Kun leike on hieman valutettu Masson E -liuoksesta ilman vesipesua, se värjätään suoraan Masson F -liuokseen 2-30 s ajan. 30 s luukudokselle ja 60 s ihokudokselle. Jäädytetyissä leikkeissä (8 μm) värjäysaikaa on lyhennettävä sopivasti ja säädettävä värjäysasteen mukaan.

9. Viipaleet huuhdellaan ja erotetaan kolmessa peräkkäisessä säiliössä 1 % jääetikkaalla, jokainen säiliö on noin 7 sekuntia. Tavoitteena on erottaa ylimääräinen aniliinisininen. Kolmas säiliö, jossa oli 1 % vesipitoista jääetikkaa, joka huuhdeltiin vedellä, tutkittiin mikroskooppisesti liiallisen sinisen värin erottelun välttämiseksi.

10. Viipaleita kuivataan kolmessa peräkkäisessä sylinterissä absoluuttista etanolia noin 3 s, 5 s ja 5 s. Viipaleet olivat läpinäkyviä ksyleenin läpi 5 minuutin ajan ja suljettiin neutraalilla kumilla.

1. Lämpötila on alhainen talvella. Kuumentamisen jälkeen suositellaan käytettäväksi Masson A -liuosta, Masson D -liuosta ja Masson F -liuosta, ja vastaavaa värjäysaikaa on myös säädettävä.

2. Masson A:n käsittelyn jälkeen viipaleiden pesuaika ei saa olla liian pitkä, mikä johtaa yleisesti heikkoon ja tummaan värjäysvaikutukseen.

3. Masson E -liuosta voidaan käyttää uudelleen. Jos väriaineliuos muuttaa väriä selvästi, se on korvattava uudella.

4. Käytä laboratoriotakkia ja kertakäyttökäsineitä käytön aikana.

Vain tutkimuskäyttöön!

Suositut Tagit: masson tricolor värjäyssarja, Kiina masson tricolor värjäyssarjan valmistajat, toimittajat, tehdas