Tuotteen esittely
|
Tuotteen nimi |
Cat.No. |
Spec. |
|
Taq U DNA -polymeraasi (bisulfiittikäsitellylle DNA:lle) |
G3346-50 |
50 rxns |
Tuotteen kuvaus/esittely
Taq U DNA Polymerase (bisulfiittikäsitellylle DNA:lle) on suunniteltu monistamaan urasiilia sisältävää templaatti-DNA:ta bisulfiittikonversion jälkeen, jota käytetään genomisen metylaatiotutkimuksessa. Tuote sisältää kuumakäynnistyksen Taq U DNA Polymerase, joka pystyy lukemaan urasiilia sisältäviä DNA-templaatteja. Samaan aikaan alukkeiden epäspesifistä pariutumista voidaan vähentää tehokkaasti, koska vasta-aineet estävät DNA-polymeraasia alhaisessa lämpötilassa. 5×Taq U Reaction Buffer on erityisesti optimoitu puskurijärjestelmä vaurioituneen DNA:n monistamiseen transformaation jälkeen, mikä voi tehokkaasti parantaa monistuksen spesifisyyttä ja saantoa.
Varastointi- ja käsittelyolosuhteet
Toimitetaan märän jään kanssa ja säilytetään -20 asteessa; voimassa enintään 12 kuukautta.
Tuote Sisällys
|
Komponentin numero |
Komponentti |
G3346-50 |
|
3346-1 |
Taq U DNA -polymeraasi |
12.5 µL |
|
3346-2 |
5 × Taq U -reaktiopuskuri |
1,25 ml |
|
3346-3 |
25 mM MgS04 |
250 µL |
|
3346-4 |
dNTP:t (kukin 2,5 mM) |
150 µL |
|
Manuaalinen |
Yksi kopio |
|
Määritys pöytäkirja / Menettelyt
1. Reaktiojärjestelmä (50 μL):
|
Komponentti |
Äänenvoimakkuus |
|
5 × Taq U -reaktiopuskuri |
10 μL |
|
25 mM MgS04 |
5 μL |
|
dNTP:t (kukin 2,5 mM) |
3 μL |
|
Forward-aluke (10 uM)a |
2 μL |
|
Käänteinen aluke (10 uM)a |
2 μL |
|
Mallib |
50 ng-100 ng |
|
Taq U DNA -polymeraasi |
0.25 μL |
|
Nukleaasiton vesi |
Jopa 50 μl |
a: Alukkeiden lopullinen pitoisuus vaihtelee välillä {{0}},2 - 1.0 μM, ja alukkeiden suositeltu pitoisuus on 0,4 μM. Kun amplifikaatiotuotetta tai epäspesifistä amplifikaatiota ei ole, MgSO4:a ja dNTP:itä voidaan säätää amplifikaatiotulosten parantamiseksi.
b: Kun templaattina käytetään bisulfiittikonversion DNA:ta (suositeltu DNA MethylCode Bisulfite Conversion Kit), suositellaan 50-100 ng jokaista 50 µl järjestelmää kohden.
2. Suosittele PCR-reaktiomenettelyä
|
Lämpötila |
Aika |
Pyörät |
|
95 astetta |
10-15 s |
30-40 |
|
55-60 astetta |
30 s |
|
|
72 astetta |
1 min/kb |
|
|
72 astetta |
5-10 min |
1 |
|
4 astetta |
Ikuisesti |
Huom
1. Pohjusteiden suunnitteluun suositellaan erityistä pohjamaalien suunnitteluohjelmaa. Sen varmistamiseksi, että bisulfiitilla transformoitu DNA voidaan monistaa hyvin, on suositeltavaa, että monistetut fragmentit eivät saisi ylittää 500 bp:tä alukkeita suunniteltaessa.
2. PCR-reaktion optimointia voidaan säätää Mg2+-pitoisuuden, templaattimäärän, entsyymimäärän, pariutumislämpötilan ja niin edelleen näkökulmista.
3. Toistuva jäädytys-sulatus-DNA-templaatti vaikuttaa monistukseen, jos tarvitset monia kokeita, se voidaan pakata ja pakastaa jäädytys-sulatusmäärän vähentämiseksi.
Vain tutkimuskäyttöön!
Suositut Tagit: taq u dna -polymeraasi (bisulfiittikäsitellylle dna:lle), Kiina taq u dna -polymeraasi (bisulfiittikäsitellylle dna:lle) valmistajat, toimittajat, tehdas
